Метод пэтч-кламп

Мембранные фрагменты

При работе с некоторыми клетками, например, с изолированными с помощью ферментов клетками миокарда, гигаомные контакты иногда формируются спонтанно, при прикосновении кончиком пипетки к поверхности клетки высокоомный контакт формируется без подсасывания. В этом случае не наблюдается никаких деформаций клеточных мембраны, и площадь мембранного фрагмента можно оценить по значению сопротивления пипетки до образования контакта. Но в большинстве случаев контакт формируется только при небольшом разрежении, создаваемом внутри пипетки. При этом поверхность мембраны деформируется, часть её втягивается внутрь пипетки на 2-3 мкм, принимая Q-образную форму. Когда фрагмент изолируют механическим отведением кончика пипетки от поверхности клетки, его У-образная форма практически не изменяется. При дальнейшем подсасывании образуется сферический пузырёк. Если известна удельная ёмкость мембраны (как правило, она составляет 1 мкф/см2), площадь фрагмента можно оценить по величине его ёмкости; обычно площадь варьирует от 2 до 25 мкм2.

Перейти на страницу:
1 2